概要

尿中アスコルビン酸定量の方法が説明されている。
尿サンプルはトリクロロ酢酸で酸性化され、妨害物質を取り除くために活性炭で振られる。(shaken=振られる　という安易な訳)
酸性の濾過は、最初にNa2HPO4を加えることによって中和される(pH7.0)。
次に、デヒドロアスコルビン酸はdithiothreitolとの孵化(incubation)でアスコルビン酸に変えて戻される。
N-ethylmaleimideとの余分なdithiothreitolの取り外しの後に、アスコルビン酸は、第二鉄イオンの減少を測定することによって、決定する。
作り出された第一鉄イオンはH3PO4の面前でα,α´-dipyridylと結合される。
尿サンプルの第一鉄イオン(その第一鉄イオンは理論的に方法を妨げる)はNa2HPO4とH3PO4の組み合わせで取り除かれる。

序論
アスコルビン酸(AsA)の定量に最も広く使用されるα,α´-dinitrophenylhydrazine(DNP)方法[1-4]はいくつかの損失を持っている。
それは、複雑であり、時間がかかる。
例えば、デヒドロアスコルビン酸(DAsA)があるカップリングDNPは3-h孵化(incubation)を必要とする。
そして、濃硫酸の滴状添加が、osazonesを溶かすのに必要である。
1955年に、サリバンとクラーク [5]は赤いオレンジα,α´-dipyridyl(DP)複合体として、Fe3+の減少とFe2+に関する見積りによるAsAについて検査するための方法を説明した。
他の減少の材料は酸性、H3PO4と高度のpH1-2の存在によって禁止される。
それらは尿、オレンジジュース、およびはちみつにおけるAsAの定量に方法を適用した。
方法はMaikel[6] とZannoni他によって改良されました。
[7] 動物の組織でAsAについて検査した。
作者は、これらの方法を再調査して、いくつかの尿成分がcross(交差とかそんな感じかも)で反応するので、尿のAsAに関する見積りには、それらが比較的敏感であって、多くの分析に十分簡単だが、特定でないことがわかった。
DP方法で得られた値はDNP方法で得られたものよりいつも高かった。
活性炭がある吸着はトリクロロ酢酸(TCA)があるときDP方法に影響できる尿成分を取り除くことができる。
このとき、AsAはDAsAに酸化する。
この酸化は尿のAsAを見積もるのにDP方法を使用できないことを意味する。
しかし、AsAへのDAsAがdithiothreitol(DTT)とN-ethylmaleimide(NEM)を使用する簡単な減少システムは筆者の[8]によって最近確立された。
このシステムの応用は総尿のアスコルビン酸(AsA+DAsA)の定量のためのDNP方法と同じくらい特定の方法を引き起こした。